保存：4℃避光保存，保質(zhì)期 12 個(gè)月。 

產(chǎn)品簡介：

     本試劑是一種通用的總 RNA 提取試劑，適用于動(dòng)植物細(xì)胞或組織及細(xì)菌的總RNA 抽提，可有效防止 RNA 在提取過程中的降解。獲得的 RNA 可直接用于 Northern 雜交，純化 mRNA，體外翻譯，RNase 保護(hù)實(shí)驗(yàn)，RT-PCR 以及cDNA 克隆等一系列操作。該試劑可用于 100 次總 RNA 提取（10 平方厘米細(xì)胞或 100mg 組織）。

操作說明：自備新開封或?qū)Ｓ寐确?、異丙醇?5%乙醇、DEPC處理水

1、細(xì)胞裂解或組織勻漿：

1)貼壁細(xì)胞：吸盡培養(yǎng)液，每 10 平方厘米（6 孔板孔或 35 mm 平皿）細(xì)胞加入 1 ml Biozol,使其覆蓋培養(yǎng)細(xì)胞， 再用吸管或加樣器吹打 2~3 次，細(xì)胞應(yīng)完全裂解，然后轉(zhuǎn)移至離心管中。 

2)懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，吸盡液體，每五百萬至一千萬（5×106-1×107）動(dòng)植物或酵母細(xì)胞，或一千萬 (1×107) 細(xì)菌，加入 1ml Biozol 。用吸管或加樣器吹打，使其完全裂解。某些酵母和細(xì)菌如裂解不充分，可用勻漿器勻漿，以確保其完全裂解。轉(zhuǎn)移至離心管中。

3)組織：先將組織剪切成小塊，放入玻璃勻漿器內(nèi)。冷凍組織可在研缽中研磨勻漿。每 50-100mg 組織加入 1ml Biozol ，勻漿至完全裂解。轉(zhuǎn)移至離心管中。

   裂解產(chǎn)物應(yīng)呈澄清的透明粘稠液體。室溫放置 5 分鐘。對(duì)于多糖、蛋白等雜質(zhì)豐富的組織樣品，勻漿后仍會(huì)存留有不溶物質(zhì)，可 12000g 4℃離心 10 分鐘，然后吸取上清至一新的離心管中。

2. 分離：在裝有裂解物的離心管中加入 0.2 倍體積的氯仿（1 ml Biozol 加入 0.2 ml 氯仿），振蕩器上充分振蕩 混勻 30 秒，室溫放置 2-3 分鐘。12000g 4℃離心 10 分鐘，然后吸取含總 RNA 的上層水相至一新的離心管中，每 毫升 Biozol 約可吸取 0.5-0.6 ml。有機(jī)相和中間層含有 DNA 和蛋白質(zhì)，應(yīng)避免觸及。 

3. 沉淀：按每毫升 Biozol 加入 0.5 ml 異丙醇，顛倒數(shù)次混勻，室溫沉淀 10 分鐘。12000g 4℃離心 10分鐘，在 管底可見 RNA 沉淀。棄上清，按每毫升Biozol 加入 1 ml 75%乙醇，輕輕顛倒混勻，以清洗RNA 沉淀。12000g  4℃離心 2 分鐘，棄去液體，小心勿丟棄 RNA 沉淀。室溫倒置晾干 5~10 分鐘。 

4. 溶解：加入適量 DEPC 處理水使 RNA 沉淀溶解。存放于-80℃。

注意事項(xiàng)：

1，RNA 提取過程中所用器皿、離心管、吸頭等應(yīng)保證無污染無 RNA 酶。操作中應(yīng)小心，防止外源性 RNA 酶污染樣品導(dǎo)致 RNA 樣品降解。 

2，試劑中含有酚等有害物質(zhì)，注意個(gè)人防護(hù)。